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BIOTECNOLOGIE MOLECOLARI

Alessandra TOSCO BIOTECNOLOGIE MOLECOLARI

0760300033
DIPARTIMENTO DI FARMACIA
CORSO DI LAUREA MAGISTRALE A CICLO UNICO DI 5 ANNI
FARMACIA
2023/2024

ANNO CORSO 4
ANNO ORDINAMENTO 2023
PRIMO SEMESTRE
CFUOREATTIVITÀ
648LEZIONE
ALESSANDRA TOSCO T Curriculum
Obiettivi
IL CORSO SI PROPONE DI FORNIRE INFORMAZIONI SULLE PRINCIPALI TECNICHE DI BIOLOGIA MOLECOLARE (CLASSICHE E INNOVATIVE) UTILIZZATE PER LA PREPARAZIONE, L’ANALISI E LA MANIPOLAZIONE DI ACIDI NUCLEICI E PROTEINE.
CONOSCENZE E CAPACITÀ DI COMPRENSIONE:
ALLA FINE DEL CORSO LO STUDENTE CONOSCERÀ LE PRINCIPALI TECNICHE PER:
-L’ISOLAMENTO E L’ANALISI DI DNA E RNA
-LA PRODUZIONE DI ORGANISMI GENETICAMENTE MODIFICATI
-LA PRODUZIONE DI FARMACI BIOTECNOLOGICI
-L'ANALISI DELLE INTERAZIONI PROTEINA-PROTEINA E PROTEINA-DNA
CAPACITÀ DI APPLICARE CONOSCENZA E COMPRENSIONE:
LO STUDENTE APPLICANDO LE COMPETENZE ACQUISITE DOVRÀ ESSERE IN GRADO DI INDICARE LE OPPORTUNE METODOLOGIE DA APPLICARE A PROBLEMI DI RICERCA DI TIPO BIOLOGICO NELL’AMBITO DI:
-ANALISI DELL’ESPRESSIONE GENICA
-PRODUZIONE DI ORGANISMI GENETICAMENTE MODIFICATI
-PRODUZIONE DI FARMACI BIOTECNOLOGICI
-INTERAZIONI PROTEINA-PROTEINA E PROTEINA-DNA
Prerequisiti
È RICHIESTA LA PROPEDEUTICITÀ DI BIOLOGIA MOLECOLARE.
Contenuti
-ANALISI DEL DNA E DELL’RNA: PURIFICAZIONE DEL DNA GENOMICO E PLASMIDICO E DELL’RNA; ANALISI QUANTITATIVA E QUALITATIVA: SPETTROFOTOMETRIA, ELETTROFORESI E METODI DI TRASFERIMENTO (4 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-ENZIMI DI RESTRIZIONE E MODIFICAZIONE, TRASFORMAZIONE E TRASFEZIONE, I VETTORI DI CLONAGGIO: PLASMIDI, VETTORI LAMBDA, M13 E COSMIDICI; I CROMOSOMI ARTIFICIALI: YAC, PAC, BAC E HAC (6 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-LA PRODUZIONE DI PROTEINE RICOMBINANTI: ESPRESSIONE IN E. COLI; VETTORI DI ESPRESSIONE; PROMOTORI COSTITUTIVI E INDUCIBILI; ESPRESSIONE IN LIEVITO: S. CEREVISIAE, P. PASTORIS, ESPRESSIONE IN CELLULE DI INSETTO E IN CELLULE DI EUCARIOTI SUPERIORI. L’UTILIZZO DELLE PROTEINE RICOMBINANTI NELLA RICERCA SCIENTIFICA E NELL’INDUSTRIA FARMACEUTICA, I FARMACI BIOTECNOLOGICI, LA PRODUZIONE DI ANTICORPI MONOCLONALI (8 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-LA PCR E LE SUE APPLICAZIONI IN CAMPO BIOMEDICO: CONDIZIONI DI REAZIONE; PCR QUANTITATIVA; LA PCR NELLA DIAGNOSI DI MALATTIE GENETICHE; IL TEST DI PATERNITÀ; LE APPLICAZIONI FORENSI (4 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-IL SEQUENZIAMENTO DEL DNA: LE TECNICHE DI BASE PER IL SEQUENZIAMENTO; IL SEQUENZIAMENTO DEI GENOMI; IL PROGETTO GENOMA UMANO. STRATEGIE DI CLONAGGIO DEI GENI: LE LIBRERIE DI DNA GENOMICO E DI CDNA; ANALISI DI UNA GENOTECA; L’IBRIDAZIONE, IL CHROMOSOME WALKING E L’ANALISI DIFFERENZIALE (4 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-ANALISI DI UN PROMOTORE: COSTRUZIONE DI PLASMIDI REPORTER; SAGGIO DELLA MOBILITÀ ELETTROFORETICA; FOOTPRINTING; IMMUNOPRECIPITAZIONE DELLA CROMATINA (4 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-STUDIO DELLE INTERAZIONI PROTEINA-PROTEINA: IL DOPPIO IBRIDO; LA COIMMUNOPRECIPITAZIONE; IL “FISHING FOR PARTNERS”; L’ANALISI MEDIANTE TECNOLOGIA SPR (2 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
-TRASFERIMENTO DI GENI IN CELLULE ANIMALI: COLTURE CELLULARI; TECNICHE DI TRASFEZIONE. MANIPOLAZIONE GENETICA DI ANIMALI: INIEZIONE NEL PRONUCLEO; CELLULE STAMINALI EMBRIONALI; METODI PER LA PRODUZIONE DI TOPI TRANSGENICI; TRASFERIMENTO DI DNA IN ALTRI VERTEBRATI; TERAPIA GENICA. ANALISI POST-GENOMICHE: I CAMBIAMENTI GLOBALI DELL’ESPRESSIONE GENICA; MICROARRAY; ANALISI PROTEOMICHE (4 ORE DI LEZIONI TEORICHE).
ESERCITAZIONI IN LABORATORIO:
-PREPARAZIONE DI UNA REAZIONE DI PCR, ALLESTIMENTO DI DIGESTIONI SINGOLE E DOPPIE PER LA COSTRUZIONE DI UNA MAPPA DI RESTRIZIONE. CONTROLLO DELLE DIGESTIONI ENZIMATICHE E DELLE PCR TRAMITE ELETTROFORESI SU GEL DI AGAROSIO (4 ORE DI ESERCITAZIONE DI LABORATORIO PER GRUPPI DI 2/3 PERSONE)
-PREPARAZIONE DI UNA REAZIONE DI LIGASI, TRASFORMAZIONE IN CELLULE COMPETENTI, PIASTRAMENTO SU TERRENO SELETTIVO. COSTRUZIONE DI UNA RETTA DI TARATURA CON METODO DEI MINIMI QUADRATI, ESTRAPOLAZIONE DEI PESI MOLECOLARI DEI FRAMMENTI DI DIGESTIONE (4 ORE DI ESERCITAZIONE DI LABORATORIO PER GRUPPI DI 2/3 PERSONE)
-DISCUSSIONE DELLA MAPPA DI RESTRIZIONE. CONTROLLO DI COLONIE RICOMBINANTI. ESTRAZIONE DI DNA PLASMIDICO TRAMITE LISI ALCALINA (4 ORE DI ESERCITAZIONE DI LABORATORIO PER GRUPPI DI 2/3 PERSONE).
Metodi Didattici
L’INSEGNAMENTO PREVEDE 36 ORE DI LEZIONI FRONTALI TEORICHE CHE SI SVOLGONO IN AULA CON L’AUSILIO DI PROIEZIONI POWERPOINT E 12 ORE DI ESERCITAZIONI CHE SI SVOLGONO IN LABORATORIO E PREVEDONO L'APPROFONDIMENTO SPERIMENTALE DELLE TECNICHE DI BASE DI MANIPOLAZIONE E ANALISI DEGLI ACIDI NUCLEICI.
Verifica dell'apprendimento
IL RAGGIUNGIMENTO DEGLI OBIETTIVI DELL’INSEGNAMENTO È CERTIFICATO MEDIANTE IL SUPERAMENTO DI UN ESAME CON VALUTAZIONE IN TRENTESIMI. L’ESAME PREVEDE UNA PROVA ORALE, DI CIRCA 30 MINUTI, DURANTE LA QUALE SARANNO PROPOSTI PROBLEMI DI RICERCA RIGUARDANTI LA PRODUZIONE DI FARMACI BIOTECNOLOGICI, LE VARIAZIONI DELL’ESPRESSIONE GENICA E LA PRODUZIONE DI ORGANISMI GENETICAMENTE MODIFICATI; LO STUDENTE DOVRÀ DIMOSTRARE DI RIUSCIRE A FOCALIZZARE IL PROBLEMA E PROPORRE L’OPPORTUNA STRATEGIA DI RICERCA PER LA SUA RISOLUZIONE.
IL VOTO MINIMO PER IL SUPERAMENTO DELL’ESAME È DI 18/30 E SARÀ ATTRIBUITO ALLO STUDENTE CHE MOSTRA CONOSCENZA DELLE METODICHE, MA LIMITATA CAPACITÀ DI FOCALIZZAZIONE DEL PROBLEMA SCIENTIFICO E DI PROPOSTA DI UNA STRATEGIA DI RICERCA. LA LODE POTRÀ ESSERE ATTRIBUITA AGLI STUDENTI CHE RAGGIUNGERANNO IL VOTO MASSIMO DI 30/30 E DIMOSTRERANNO DI AVERE COMPLETA PADRONANZA DELLE TECNOLOGIE E DELLE STRATEGIE DI RICERCA E DI ANALISI IN AMBITO BIOTECNOLOGICO.
Testi
BROWN T.A.-BIOTECNOLOGIE MOLECOLARI-ZANICHELLI-ISBN: 978-88-08-16746-0
TESTI CONSIGLIATI PER APPROFONDIMENTI:
REECE R.J.-ANALISI DEI GENI E DEI GENOMI -EDISES- ISBN: 8879593463
AMALDI ET AL., TECNICHE E METODI PER LA BIOLOGIA MOLECOLARE-CEA- ISBN: 978-88-08-92034-8
  BETA VERSION Fonte dati ESSE3 [Ultima Sincronizzazione: 2024-12-17]